Marie Gignac est née à Québec et elle y habite toujours. Après des études de lettres à l’Université Laval, elle reçoit sa formation de comédienne au Conservatoire d’art dramatique de Québec. Elle commence sa carrière comme pigiste en travaillant pour la plupart des compagnies de théâtre de la capitale ; puis, c’est la rencontre avec Robert Lepage avec qui elle conçoit, écrit et joue La Trilogie des Dragons et Les Plaques Tectoniques, spectacles avec lesquels elle effectue de nombreuses tournées internationales. Elle joint les rangs du Théâtre Repère, dont elle devient co-directrice artistique en 1991. En 1993, elle participe à la naissance d’Ex Machina, la compagnie de Robert Lepage. Elle travaille à l’élaboration de plusieurs projets, comme autrice et comédienne, dont le spectacle Les Sept branches de la rivière Ota, en tournée mondiale de 1994 à 1998. Elle y crée le personnage de Patricia Hébert, qu’elle reprend au cinéma dans Nô réalisé par Lepage. Elle interprète aussi Françoise dans le premier film de Lepage, Le Confessionnal, rôle pour lequel elle reçoit une nomination aux prix Génies. Très active dans le milieu théâtral québécois, elle a été un des membres fondateurs du Théâtre Périscope, puis vice-présidente du Carrefour international de théâtre de Québec, dont elle assume la direction artistique de 1997 à 2023. De 1997 à 2001, elle siège au conseil d’administration du Conseil des arts et des lettres du Québec. Elle signe sa première mise en scène professionnelle en 1999 au Théâtre de La Bordée, où elle monte trois courtes pièces de Luigi Pirandello réunies sous le titre de Comédies siciliennes. À l’hiver 2002, elle met en scène au Théâtre du Trident L’officier de la garde de Ferenc Molnar, puis en 2005, Six personnages en quête d’auteur de Pirandello (Prix de l’Association québécoise des critiques de théâtre, section Québec). En 2007, elle monte sa propre adaptation de Les Mains sales de Jean-Paul Sartre ; le spectacle récolte quatre Masques dont ceux de la meilleure mise en scène et de la meilleure production/​Québec. En 2008, elle dirige un Cyrano de Bergerac qui sera repris en tournée l’automne suivant partout au Québec ainsi qu’au Centre national des arts à Ottawa et qui obtiendra également le Prix de L’AQCT. En 2010, toujours au Trident, elle met en scène Henri IV, de Pirandello, et en 2012, elle crée Je pense à Yu de Carole Fréchette au Théâtre d’Aujourd’hui. Elle collabore régulièrement aux spectacles de Robert Lepage, notamment à la conception et à l’écriture de Le Projet Andersen et de Lipsynch. En 2005, elle reçoit le Prix de l’Institut Canadien, récompensant son exceptionnelle contribution aux arts et aux lettres dans la région de Québec et, en 2010, conjointement avec Dominique Violette, le Prix du développement culturel de la Ville de Québec pour la création, avec Frédéric Dubois, du grand spectacle Où tu vas quand tu dors en marchant…? présenté annuellement depuis. Parmi les pièces qu’elle a jouées au fil des ans, mentionnons : au Théâtre de la Bordée, L’Hôtel des horizons, de Reynald Robinson, où son rôle de Noëlline lui vaut une nomination pour la meilleure interprétation féminine au gala des Masques 2001 ; La Déposition, d’Hélène Pedneault, le rôle de Léna Fulvi lui méritant une nomination pour le Prix Paul-Hébert en 2002, Les trois sœurs de Tchekhov sous la direction de Wajdi Mouawad, spectacle qui a tourné en France et à travers le Québec avant d’être présenté au Théâtre du Nouveau Monde au printemps 2005, puis repris au Festival Tchekhov à Moscou en juillet 2010. À l’automne 2008, elle interprète Galactia dans Tableau d’une exécution de Howard Barker, dirigé par Gill Champagne, rôle pour lequel elle est mise en nomination pour le Prix Paul-Hébert. Au grand écran, on l’a vue dans La loi du cochon et Nez Rouge, d’Érik Canuel, La vie avec mon père de Sébastien Rose et La Vie secrète des gens heureux de Stéphane Lapointe, aux côtés de Gilbert Sicotte. Elle est de plusieurs séries télévisées, dont Nos étés, Smash, La Chambre numéro 13, et Fortier où sa performance lui a mérité une nomination aux Prix Gémeaux. Elle est récipiendaire de la Médaille de la Ville de Québec, Membre de l’Ordre du Canada et Chevalière puis Officière des Arts et des Lettres de la République française.